骨骼肌細胞因其纖維化結構緊密、細胞間連接復雜，傳統手工制備方法不僅耗時費力，更易因機械剪切力失控導致細胞活率驟降（活率常低于60%），嚴重制約了科研研究的實驗效率和數據的可靠性。為更好地制備骨骼肌細胞懸液，今天我們就選用一款實驗室人人推薦的凈信JX-DLDXB系列單細胞懸液制備儀，來進行實驗操作。
實驗目的：借助單細胞懸液制備儀與配套試劑，將小鼠骨骼肌組織快速解離為形態完整、活率高的單細胞懸液，滿足單細胞測序、細胞培養、流式分析等后續實驗需求。
實驗材料與儀器清單：
1.實驗材料：小鼠骨骼肌組織、骨骼肌組織單細胞解離酶(貨號：MJ010)、紅細胞裂解液(貨號：MJ103)、預冷PBS緩沖液、臺盤藍染色液。
2.儀器清單：無菌手術器械套裝(眼科剪、鑷子)、單細胞懸液制備儀、高速冷凍離心機、倒置顯微鏡、無菌EP管、精準移液系統。
單細胞制備儀對小鼠骨骼肌組織懸液制備的實驗步驟：
1.試劑預處理：需要先將骨骼肌組織單細胞解離酶置于冰上解凍，全程保持冰浴狀態備用，避免酶活性流失。
2.小鼠處理與組織取材：采用斷頸法處死小鼠后，迅速分離出骨骼肌組織，用預冷PBS緩沖液反復沖洗，去除表面血液、筋膜等雜質。稱取約130mg潔凈的骨骼肌組織，剪碎、放入單細胞制備儀的研磨管中，加入所需酶。
3.儀器消化：采用斷頸法處死小鼠后，迅速分離出骨骼肌組織，用預冷PBS緩沖液反復沖洗，去除表面血液、筋膜等雜質。稱取約130mg潔凈的骨骼肌組織，剪碎、放入單細胞制備儀的研磨管中，加入所需酶。
4.紅細胞裂解與清洗：用3-5倍體積的紅細胞裂解液重懸細胞沉淀，冰上孵育10分鐘，期間用移液系統輕柔吹打2-3次。隨后再次以 4℃、300g離心5分鐘，棄上清后用預冷PBS緩沖液清洗重懸2次，去除殘留裂解液。
5.細胞重懸與鏡檢質控：用適量PBS緩沖液重懸細胞沉淀，取少量細胞懸液與臺盤藍染色液按比例混合，滴加至細胞計數板上，通過倒置顯微鏡觀察細胞形態并計算活率。
單細胞制備儀對小鼠骨骼肌組織懸液制備的實驗結果與優勢：
1.核心結果：
①胞形態：經儀器制備的細胞透亮圓潤，形態完整，無明顯細胞碎片和組織殘渣。
②細胞活率：臺盤藍染色檢測顯示，活細胞率穩定≥95%，滿足高要求實驗標準。
③細胞數量：離心后可見明顯細胞沉淀，重懸后的單細胞懸液均勻分散，無團聚現象。
2.儀器制備化優勢：
①效率提升：組織破碎、酶解消化等步驟通過儀器標準化完成，全程耗時縮短 30% 以上。
②穩定性強：避免手動操作的力度、速度差異，實驗結果可重復性高。
③損傷更小：儀器研磨和振蕩溫和，減少細胞機械損傷，顯著提升細胞活率。
上海凈信單細胞懸液制備儀可在15-30分鐘內完成骨骼肌細胞懸液的制備，不僅顯著縮短了實驗處理時間，同時更是將細胞活率提升至95%以上，為其提供“快、準、穩”的標準化解決方案。讓小鼠骨骼肌單細胞懸液的制備更高效、更穩定，實現效率與活率雙突破，為后續實驗提供可靠的樣本保障。
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